Різниця між 1D та 2D гелевим електрофорезом

The ключова різниця між 1D та 2D гелевим електрофорезом є властивості, що використовуються для поділу білків на гель-електрофорезі. 1D гель-електрофорез розділяє тільки білки на основі молекулярної маси, тоді як 2D гель-електрофорез розділяє білки на основі його ізоелектричної точки та молекулярної маси.

Відокремлення білка методом гель-електрофорезу є важливою методикою характеристики білків. Білки мають різні властивості; отже, поділ є більш складним порівняно з поділом ДНК електрофорезом гелю Агарози.

ЗМІСТ

1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке 1D гелевий електрофорез
3. Що таке 2D гелевий електрофорез
4. Подібність між 1D та 2D гелевим електрофорезом
5. Порівняльне порівняння - 1D проти 2D гелевий електрофорез у табличній формі
6. Підсумок

Що таке 1D гелевий електрофорез?

1D гелевий електрофорез, відомий також як гель-електрофорез з одномірними розмірами, - це метод поділу білка на основі молекулярної маси. Виділення білка в основному відбувається за допомогою електрофорезу поліакриламідного гелю. Спираючись на концепцію гель-електрофорезу, молекули поділяють за своєю властивістю молекулярну масу та заряд.

Отже, щоб надати білкам рівномірний заряд, до гель-електрофорезу проводять обробку додецилсульфатом натрію (SDS). SDS денатурує білки і забезпечує рівномірний негативний заряд білка; коли відбувається застосування електричного поля, білки мігрують до позитивного терміналу виходячи з їх молекулярної маси. Таким чином, при розділенні розглядається лише одна властивість. Ось чому цей метод називають 1D гелевим електрофорезом.

Малюнок 01: 1D гелевий електрофорез

Під час 1D гель-електрофорезу білки відокремлюються виходячи з їх молекулярної маси. У зв'язку з цим молекули меншої ваги мігрують швидше в гелі порівняно з білками з високою молекулярною масою. Таким чином, білки з високою вагою залишаються близько до лунок.

Що таке 2D гелевий електрофорез?

2D гель-електрофорез або двовимірний гелевий електрофорез розділяє білки за двома властивостями. Дві властивості - ізоелектрична точка білка і молекулярна маса. Цей спосіб поділу білка збільшує роздільну здатність поділу білка. Ізоелектрична точка білка залежить від рН, при якому білок є нейтральним.

Малюнок 02: 2D гелевий електрофорез

Таким чином, при 2D гель-електрофорезі білку дозволяють працювати в фіксованому градієнті рН в першому вимірі. У другому вимірі білки розділяються за допомогою вертикального або горизонтального поліакриламідного гель-електрофорезу. Таким чином, білки розділяються відповідно до їх молекулярної маси у другому вимірі.

Крім того, цей метод гель-електрофорезу збільшує роздільну здатність поділу білка. Тому відокремлені білки чистіші. Однак вартість методики набагато вище, ніж одномірний гелевий електрофорез.

Які подібності між 1D та 2D гелевим електрофорезом?

• Обидві методики розділяють білки.
• Отже, вони важливі в характеристиці білків.

Яка різниця між 1D та 2D гелевим електрофорезом?

Ключова відмінність між 1D та 2D гель-електрофорезом полягає в тому, що 1D гель-електрофорез розділяє білки лише на молекулярній масі, тоді як 2D гель-електрофорез розділяє білки на основі як електричної точки, так і молекулярної маси. У зв'язку з цією основною різницею між двошаровим та двовимірним гелефофорезом, роздільна здатність поділу білків і вартість двох методів також різняться. 2D гелевий електрофорез демонструє високу роздільну здатність, ніж 1D гелевий електрофорез. Однак 2D гелевий електрофорез є більш затратним, ніж 1D гелевий електрофорез.

Нижче в інфографіці узагальнено різницю між 1D та 2D гелефофорозом.

Підсумок - 1D проти 2D гель-електрофорез

Поділ білків залежить від багатьох факторів. 1D гель-електрофорез розділяє білки на основі лише молекулярної маси. Однак двомірний або двовимірний електрофорез гелю збільшує роздільну здатність поділу білка. Далі, 2D гель-електрофорез розділяє білки на основі ізоелектричної точки і молекулярної маси. Тому ці дані важливі для подальшої обробки білків і в галузі протеоміки. Таким чином, це підсумок різниці між 1D та 2D гелевим електрофорезом.

Довідка:

1. Галева, Надія та МихайлоАльтерманн. "Порівняння одновимірного та двовимірного гелефорофорезу як інструмента розділення для протеомічного аналізу мікросом печінки щурів: цитохромів Р450 та інших мембранних білків". Протеоміка, Національна медична бібліотека США, червень 2002 р., Доступна тут.

Надано зображення:

1. "Електрофорез - заповнення 1D гелевих лунок сумішшю білків" Жан-Етьєн Пуар'є - Заповнення 1D гелевих лунок сумішшю білків (CC BY-SA 2.0) через Commons Wikimedia
2. "2D електрофорез" Національного інституту охорони здоров'я - Центру нанобіології досліджень раку, Національного інституту охорони здоров'я (Public Domain) через Commons Wikimedia