Різниця між хроматографією спорідненості та іонообміну

The ключова різниця між спорідненістю та іонообмінною хроматографією є те ми можемо використовувати афінну хроматографію для розділення заряджених або незаряджених компонентів у суміші, тоді як ми можемо використовувати іонообмінну хроматографію для розділення заряджених компонентів у суміші.

Хроматографія - це техніка, яку ми можемо використовувати для розділення потрібних компонентів у суміші. Існують різні типи, такі як рідинна хроматографія, газова хроматографія тощо. Споріднена хроматографія та іонообмінна хроматографія - це дві підкатегорії рідкої хроматографії. Також у цих техніках є дві фази. А саме - це стаціонарна фаза і рухлива фаза. Мета цих методик - розділити компоненти, залежно від зв'язування компонентів, у рухливій фазі на поверхню нерухомої фази.

ЗМІСТ

1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке хроматографія спорідненості
3. Що таке іонообмінна хроматографія
4. Порівняльне порівняння - хроматографія Affinity vs Ion Exchange у табличній формі
5. Підсумок

Що таке хроматографія спорідненості?

Аффінна хроматографія - це біохімічна методика, яку ми використовуємо для розділення компонентів у суміші залежно від взаємодії цих компонентів.

Взаємодії, які ми використовуємо в цьому випадку, включають наступне:

1. Взаємодії антиген-антитіло
2. Ензимно-субстратні взаємодії
3. Реакція-ліганд взаємодії
4. Білково-нуклеїнові кислотні взаємодії

У цій техніці ми використовуємо молекулярні властивості молекул для цієї методики поділу. Тут ми дозволяємо бажаній сполуці взаємодіяти зі стаціонарною фазою через водневі зв’язки, іонну взаємодію, дисульфідні мости, гідрофобну взаємодію і т. Д. Молекули, які не взаємодіють зі стаціонарною фазою, спочатку елююють. Таким чином, ми можемо відокремити його від суміші. Бажане з'єднання залишиться приєднаним до нерухомої фази. Тому ми можемо відокремити його за допомогою елююючого розчинника і зробити так, щоб він також був відокремленим.

Малюнок 01: Хроматографічна колона

Аффінна хроматографія корисна при очищенні та концентруванні речовини із суміші за допомогою буферного розчину. Також корисно зменшити небажані речовини в суміші. Розглядаючи апарат, який ми використовуємо для цього процесу, ми повинні використовувати стовпчик, заповнений нашою стаціонарною фазою. Потім ми повинні завантажити мобільну фазу, яка містить біомолекули, які ми збираємося відокремити. Далі дозвольте їм зв’язатись із нерухомою фазою. Після цього за допомогою промивного буфера ми можемо відокремити нецільові біомолекули, але цільові молекули повинні мати високу спорідненість до стаціонарної фази, щоб успішно ділити процес поділу..

Що таке іонообмінна хроматографія?

Іонна хроматографія - це форма рідинної хроматографії, в якій ми можемо аналізувати іонні речовини. Часто ми використовуємо його для аналізу неорганічних аніонів та катіонів (тобто аніонів хлориду та нітратів та калію калію, катіонів натрію). Хоча це рідше, ми також можемо проаналізувати органічні іони. Більше того, ми можемо використовувати цю методику для очищення білків, оскільки білки заряджаються молекулами при певних значеннях рН. Тут ми використовуємо тверду нерухому фазу, до якої можуть приєднатися заряджені частинки. Наприклад, в якості твердої основи можна використовувати сополімери полістирол-дивінілбензолу смоли.

Малюнок 02: Фази хроматографії іонообміну

Щоб пояснити це далі, нерухома фаза має фіксовані іони, такі як аніони сульфату або катіони четвертинного аміна. Кожне з цього має асоціюватися з протиіоном (іоном із протилежним зарядом), якщо ми хочемо підтримувати нейтралітет цієї системи. У цьому випадку, якщо протиіоном є катіон, то систему ми називаємо катіонообмінною смолою. Але, якщо протиіоном є аніон, то система є аніонообмінною смолою.

Існує п'ять основних фаз процесу іонообміну;

1. Початковий етап
2. Адсорбція цілі
3. Початок елюції
4. Кінець елюції
5. Регенерація

Яка різниця між спорідненістю та іонообмінною хроматографією?

Аффінна хроматографія - це біохімічна методика, яку ми використовуємо для розділення компонентів у суміші залежно від взаємодії між цими компонентами, тоді як іонна хроматографія - це форма рідинної хроматографії, в якій ми можемо аналізувати іонні речовини. Тому основна відмінність між спорідненістю та іонообмінною хроматографією полягає в тому, що ми можемо використовувати іонообмінну хроматографію лише для поділу іонних речовин, тоді як афінна хроматографія здатна розділяти як заряджені, так і незаряджені частинки. Розглядаючи принцип роботи, різниця між спорідненістю та іонообмінною хроматографією полягає в тому, що афінна хроматографія протікає через те, що молекули-мішені мають високу спорідненість до стаціонарної фази. Однак для іонообмінної хроматографії молекули-мішені мають заряд, протилежний тому, який має нерухома фазова поверхня.

Наведена нижче інформація показує різницю між спорідненістю та іонообмінною хроматографією як порівняльне порівняння.

Підсумок - Хроматографія Affinity vs Ion Exchange

Підсумовуючи, афінність та іонообмінна хроматографія - це дві форми рідинної хроматографічної методики. Ключова відмінність між спорідненістю та іонообмінною хроматографією полягає в тому, що ми можемо використовувати афінну хроматографію для розділення заряджених або незаряджених компонентів у суміші, тоді як ми можемо використовувати іонообмінну хроматографію для розділення заряджених компонентів у суміші.

Довідка:

1. «Хроматографія спорідненості». Wikipedia, Фонд Вікімедіа, 5 жовтня 2018. Доступний тут 
2. Лібретексти. "Хроматографія іонообміну". Хімія LibreTexts, Libretexts, 29 грудня 2016. Доступно тут  

Надано зображення:

1. "Нікелева смола" від Pdcook - Власна робота, (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia 
2. "Iex" автор Daliak (Public Domain) через Вікісховище Commons