Різниця між Бредфордським та Лоурі-білковим аналізом

The ключова різниця між брадфордським і низькопробним протеїновим аналізом це те, що Аналіз протеїну Бредфорда заснований на зрушенні абсорбції барвника Coomassie блискучого синього G-250, тоді як аналіз протеїну Лоурі заснований на реакції іонів міді (Cu +), що утворюються при окисленні пептидних зв'язків реагентом Фолін-Ціокалтеу.

Аналіз - це аналітична методика, яка допомагає охарактеризувати основні функціональні компоненти вибірки. Отже, аналіз може бути або якісним, або кількісним випробуванням. У багатьох областях, включаючи лабораторну медицину, фармакологію, біологію навколишнього середовища, молекулярну біологію, біохімію та імунологію, регулярно використовують цей аналіз. Бредфордський і Лоурі-білковий аналіз - це два біохімічні аналізи, які визначають концентрацію білка в зразку розчину. Обидва аналізи використовують колориметричні методи для отримання результатів.

ЗМІСТ

1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке аналіз протеїну на Бредфорді
3. Що таке аналіз на низький протеїн
4. Подібність між Бредфордським і Лоурі-протеїновим аналізом
5. Поплечне порівняння - аналіз Бредфорда проти Лоурі з протеїном у табличній формі
6. Підсумок

Що таке Бредфордський протеїновий аналіз?

Аналіз протеїнів Бредфорда - це швидка спектроскопічна аналітична процедура для аналізу білка. Це показує високу точність при вимірюванні концентрації білка в розчині. Маріон Бредфорд представила цю процедуру в 1976 р. В цьому аналізі загальна реакція заснована на амінокислотному складі вимірюваних білків. Іншими словами, аналіз протеїну Бредфорда - це колориметричний аналіз. Для цього використовується барвник Coomassie блискучий синій. Отже, цей колориметричний протеїновий аналіз залежить від зсуву абсорбції барвника. Кумассі блискучий синій G-250 існує в трьох форматах: катіонний (червоний), аніонний (синій) та нейтральний (зелений). Під час кислих умов червона форма барвника перетворюється на синю. Це підтверджує зв'язування білка. Якщо білка немає, розчин може залишитися коричневого кольору.

Фігура 01: Аналіз протеїну Бредфорда

Аналіз протеїну Бредфорд відрізняється від інших білкових аналізів, оскільки він менш сприйнятливий до втручання різних хімічних сполук, присутніх у розчині білка. Ці сполуки включають натрій, калій, глюкозу та сахарозу тощо.

Що таке аналіз на низький протеїн?

Аналіз на низький білок - це біохімічний аналіз, який використовується для визначення загального рівня білка в розчині. Олівер Х. Лоурі - людина, яка розробила цей реагент у 1940 р. Процедура зображує загальну концентрацію білка розчину шляхом зміни кольору, пропорційного концентрації білка в розчині. Отже, це також колориметричний аналіз білка.

В основі цієї процедури лежить реакція між іонами міді (Cu +), що утворюється при окисленні пептидних зв'язків та реактивом Фолін-Ціокалтеу. Також цей реагент містить фосфомолібдонову кислоту та фосфор-вольфрамову кислоту. Однак механізм реакції аналізу білка Лоурі недостатньо вивчений. Але воно включає окислення залишків цистеїну, триптофану та тирозину за рахунок відновлення реагенту Фолін-Ціокалтеу.

Фігура 02: Аналіз білка на низькому рівні

Залишки цистеїну сприяють абсорбції, що спостерігається в аналізі білка Lowry, і реакція призводить до отримання блискучої синьої молекули; гетерополь молібден синій. Відновлення цієї молекули вимірюється поглинанням при 660 нм. Отже, концентрація залишків цистеїну та триптофану, що знижували реагент Фолін-Ціокалтеу, виводить загальну концентрацію білка в розчині.

Які схожість між Бредфордським та Лоурі-протеїновим аналізом?

• Бредфордський і Лоурі білковий аналізи визначають концентрацію білка в розчині.
• Обидва методи є колоуриметричними методами.
• Також чутливість обох методів висока.

Яка різниця між Бредфордським та Лоурі-аналізом протеїнів?

Бредфордський і Лоурі-білковий аналіз - це два типи аналізів, що визначають концентрацію білка в розчині. Аналіз протеїну Бредфорда покладається на зсув абсорбції барвника Coomassie блискучого синього G-250, тоді як аналіз протеїну Лоурі залежить від реакції іонів міді, що утворюються при окисленні пептидних зв'язків, з реагентом Фолін-Ціокалтеу. Отже, це ключова відмінність між тестом на протеїни Бредфорда та Лоурі. Аналіз протеїну Бредфорда займає 15 хвилин для отримання результату, тоді як аналіз протеїну Ленді займає 40-60 хвилин для отримання результату. Таким чином, це ще одна відмінність між тестом на протеїни Бредфорда та Лоурі. Крім того, аналіз протеїну Бредфорда залежить від складу амінокислот, в той час як аналіз протеїну Лоурі частково залежить від амінокислотного складу. Отже, це також різниця між тестом на протеїни Бредфорда та Лоурі.

Нижче inforaphic надає більш детальну інформацію про різницю між тестом на протеїни Бредфорда та Лоурі.

Підсумок - Тест на протеїн Бредфорд проти Лоурі

Аналіз - це аналітична методика, яка використовується для характеристики основної функціональної складової вибірки. Бредфордський і лоурі-білковий аналіз - це два типи протеїнових аналізів, які функціонують у колориметричних методах. Як Бредфордський, так і Лоурі аналіз білків визначають концентрацію білка в розчині. Однак, ключова відмінність між Бредфордським та Лоурі-білковим аналізом полягає в колориметричній техніці, яку вони використовують. В аналізі протеїнів Бредфорда використовується блискуче синій G-250 Coomassie, а в досліді Lowry на білках використовуються іони міді (Cu +) та реагент Folin-Ciocalteu. Крім того, метод Бредфорда дає швидкі результати, ніж аналіз білка Lowry. Однак обидва методи є високочутливими методами і піддаються втручанню різних речовин.

Довідка:

1. «Канадський журнал ботаніки». Канадський журнал ботаніки - 60 (7): 1046 - PDF, доступний тут.
2. «Хімія аналізів білка». Thermo Fisher Scientific - США, доступний тут.

Надано зображення:

1. "Бредфордський аналіз протеїну" від Helito - Власна робота (CC BY-SA 4.0) через Wikimedia Commons