Різниця між гібридизацією in situ та імуногістохімією

Ключова різниця - гібридизація в ситуті проти імуногістохімії
 

Діагностика раку та інфекційних захворювань є популярною тенденцією, коли нові методи, засновані на протеоміці та геноміці, використовуються з метою ідентифікації пухлин чи інфекційних клітин, її розповсюдження та місць розвитку клітин та аналізу генетичної основи більшості інфекційних та незаразних захворювань. Це призведе до точної обробки та розробки лікарських засобів, а також до розробки спеціалізованих методів лікування захворювань. Гібридизація in situ (ISH) та Імуногістохімія (IHC) - дві такі широко використовувані методи в біології раку, а ключова відмінність між гібридизацією in situ та імунохімією полягає в молекулах, які використовуються в процедурі аналізу. У ISH зонди нуклеїнової кислоти використовуються в аналізі, тоді як в IHC для діагностичного визначення використовуються моноклональні та поліклональні антитіла..

ЗМІСТ

1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке гібридизація в ситу
3. Що таке імуногістохімія
4. Подібність між гібридизацією in situ та імуногістохімією
5. Поплечне порівняння - в гібридизації ситу проти імуногістохімії в табличній формі
6. Підсумок

Що таке гібридизація в ситу (ISH)?

Гібридизація in situ - це техніка гібридизації нуклеїнової кислоти, яка безпосередньо виконується на частині або ділянці тканини, у всій тканині або в клітинах. Методика залежить від теорії додаткового спарювання базових даних Уотсона Крика, в результаті чого виникають або гібриди ДНК-ДНК, або гібриди ДНК-РНК, які можуть виявляти мутовані гени або ідентифікувати необхідний цікавить ген. Одноланцюгові послідовності ДНК, дволанцюгові послідовності ДНК, одноцепочечні РНК-послідовності або синтетичні олігонуклеотидні послідовності використовуються як зонди під час техніки гібридизації, і ці зонди мічуються радіоактивним фосфором на його 5 'кінці для ідентифікаційних процедур при авторадиографії або маркуються за допомогою флуоресцентних барвників. . Існують різні типи методів ISH, що базуються на типі використовуваного зонда та виду техніки візуалізації, що застосовується.

Малюнок 01: Флуоресцентна гібридизація в ситу

Існує багато застосувань ISH, головним чином у молекулярній діагностиці інфекційних захворювань, щоб виявити наявність збудників та підтвердити збудника за допомогою молекулярної діагностики. Застосовується також у сферах біології розвитку, каріотипізації та філогенетичного аналізу та фізичного відображення хромосом.

Що таке імуногістохімія (IHC)?

У техніці IHC основною аналізованою молекулою є антиген. Під час IHC використовуються моноклональні та поліклональні антитіла для визначення наявності антигенів при інфекції або стану злоякісної проліферації клітин. Метод заснований на зв'язуванні антиген-антитіло, і для цієї методики використовуються мітки ферментів; одним із таких застосувань є ІФА (імуноферментний аналіз). Маркери також можуть бути антитілами з міткою флуоресцентного типу або антитілами з міткою радіо.

Малюнок 02: Імуногістохімія

IHC широко використовується для виявлення ракових клітин. Діагностичні процедури спрямовані на антигени, наявні на пухлинних клітинах для ідентифікації та характеристики пухлини. Ця ж процедура застосовується для діагностики інфекційних агентів. Моноклональні та поліклональні антитіла також використовуються для аналізу різних генних продуктів, включаючи реакцію зв'язування антитіло-антиген між бажаним білком та введеним синтетичним антитілом.

Які подібності між гібридизацією в ситу і імуногістохімією?

• ISH та IHC - це високоспецифічні реакції.
• Обидві методи дуже точні.
• Обидві методи можуть бути використані в діагностиці раку та інфекційних захворювань.
• Ці методи виконуються у стерильних середовищах in vitro.
• Обидва - це швидкі методи, що дають відтворювані результати.
• ISH та IHC використовують методи виявлення, такі як радіомаркування та методи флуоресценції.

Яка різниця між гібридизацією в ситу і імуногістохімією?

В гібридизації Ситу проти Іммуногістохімії
ISH - це метод гібридизації нуклеїнової кислоти, який безпосередньо виконується на частині або ділянці тканини або всій тканини.	IHC - це техніка, в якій моноклональні та поліклональні антитіла використовуються для визначення наявності антигенів, які є спеціальними білковими маркерами, розміщеними на поверхні клітин..
Тип аналізованих біомолекул
ISH аналізує нуклеїнові кислоти.	IHC аналізує білки-антигени.
Основи біохімічної реакції
Комплементарне спарювання бази між ДНК-ДНК або ДНК-РНК відбувається в цій техніці.	Взаємодії антиген-антитіло беруть участь у імуногістохімії.
Способи виявлення ферментів
Ензимні методи виявлення не можуть бути використані в ISH.	Ензимні методи виявлення можуть бути використані в МГК.

Підсумок - Гібридизація в ситуті проти імуногістохімії

Молекулярна діагностика - це швидкі та підтверджуючі методи, які можна використовувати для виявлення незаразного захворювання, такого як рак або інфекційне захворювання, такого як ВІЛ чи туберкульоз, на основі молекулярних маркерів, наявних у клітинах, що призводять до прояву захворювання. Молекулярні маркери можуть бути присутніми у вигляді експресованих білків або на генетичному рівні, на основі яких вводяться різні нові методи для підвищення ефективності та менш трудомісткі, хоча ці методи мають високу вартість. Таким чином, ISH залежить від гібридного утворення ДНК-ДНК або ДНК-РНК, а IHC залежить від специфічних реакцій між антитілом та антигеном. Це різниця між гібридизацією in situ.

Завантажити PDF-версію гібридизації In Situ vs Імуногістохімії

Ви можете завантажити PDF-версію цієї статті та використовувати її в офлайн-цілях відповідно до примітки. Завантажте PDF-версію тут. Різниця між гібридизацією в ситу і імуногістохімією.

Список літератури:

1. Дурайян, Джеяпрадха та ін. «Застосування імуногістохімії». Журнал фармації та біологічно пов'язаних наук, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, серпня 2012 р., Доступний тут. Доступ 24 серпня 2017 року.
2. "Гібридизація в ситу (ISH)". Національний центр інформації про біотехнології, Національна медична бібліотека США, доступний тут. Доступ 24 серпня 2017 року.

Надано зображення:

1. "РИБИ (флуоресцентна гібридизація в ситу)" від MrMatze - Власна робота (CC BY-SA 3.0) через Wikimedia Commons
2. «Імуногістохімічне забарвлення2» Автор Імоен в англійській Вікіпедії (CC BY-SA 3.0) через Вікісховище