Різниця між зворотною фазою та нормально-фазовою ВЕРХ

The ключова різниця між зворотною фазою і нормальною фазою ВЕРХ є те, що зворотна фаза ВЕРХ використовує полярну нерухому фазу і менш полярну рухливу фазу, тоді як нормальна фаза ВЕРХ використовує неполярну нерухому фазу і полярну рухливу фазу.

Нормальна фаза ВЕРХ - це найдавніша методика ВЕРХ, яку Цветт використовував при розділенні рослинних екстрактів; він використовував крейду в скляній колонці. Це був класичний режим хроматографії, який призвів до називання його як "нормальної" методики. Зворотно-фазова ВЕРХ, з іншого боку, є протилежністю звичайній методиці, яку вчені розробили останнім часом.

ЗМІСТ

1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке зворотна фаза ВЕРХ
3. Що таке нормальна фаза ВЕРХ
4. Порівняльне порівняння - зворотна фаза проти нормальної фази ВЕРХ у табличній формі
5. Підсумок

Що таке зворотна фаза ВЕРХ?

Зворотна фаза ВЕРХ - це хроматографічна методика, в якій ми використовуємо стаціонарну гідрофобну фазу. Серед усіх методів ВЕРХ ми використовуємо цей метод приблизно на 70% через його широку застосованість та відтворюваність. Стаціонарна фаза неполярна, а рухлива фаза - полярна.

У більшості випадків вчені використовують водну суміш води з змішуваним, полярним органічним розчинником, таким як ацетонітрил або метанол, як рухливу фазу. Тому аналіти взаємодіють з неполярною нерухомою фазою.

Що таке нормальна фаза ВЕРХ?

Нормально-фазова ВЕРХ - це хроматографічна методика, в якій ми використовуємо стаціонарну гідрофільну фазу. Це традиційний метод ВЕРХ, хоча ми не дуже його використовуємо. Стаціонарна фаза полярна, а рухлива фаза неполярна. Що ще важливіше, рухлива фаза цієї методики є 100% органічною. Це означає, що для цього не використовується вода.

Рисунок 01: Проба зразка для хроматограм HPLC з нормальною фазою та зворотною фазою відповідно до полярності компонентів в аналіті.

Зазвичай нерухома фаза містить діоксид кремнію, ціано, діол, фази, пов'язані з амінокислотами тощо. Мобільні фази включають органічні розчинники, такі як гексан, етилацетат тощо. Ця методика заснована на утримуванні молекул розчинника або аналізованих речовин на полярній нерухомій фазі..

Яка різниця між зворотною фазою та нормально-фазовою ВЕРХ?

Зворотна фаза ВЕРХ - це хроматографічна методика, в якій ми використовуємо стаціонарну гідрофобну фазу. Стаціонарна фаза цієї методики неполярна. Стаціонарна фаза неполярна, тоді як рухлива фаза - полярна. Більше того, вчені використовують водну суміш води з змішуваним полярним органічним розчинником, таким як ацетонітрил або метанол, як рухливу фазу ВЕРХ із зворотною фазою. Тоді як звичайна фаза ВЕРХ є хроматографічною методикою, в якій ми використовуємо стаціонарну гідрофільну фазу. Стаціонарна фаза цієї техніки - полярна. Стаціонарна фаза полярна, тоді як рухлива фаза неполярна. На додаток до цього вчені використовують органічні розчинники, такі як гексан, етилацетат тощо, як мобільну фазу ВЕРХ нормальної фази. Інфографіка нижче представлена ​​різницею між зворотною фазою та нормальною фазою ВЕРХ у табличному вигляді.

Підсумок - Зворотна фаза проти нормальної фази ВЕРХ

Методи зворотної фази та звичайна фаза ВЕРХ є двома методами рідинної хроматографії. Різниця між зворотно-фазовою та нормально-фазовою ВЕРХ полягає в тому, що ВЕРХ із зворотною фазою використовує полярну стаціонарну фазу та менш полярну рухливу фазу, тоді як нормальна фаза ВЕРХ використовує неполярну стаціонарну фазу та полярну рухливу фазу.

Довідка:

1. Води. "Режими поділу ВЕРХ". ВЕРХ - високоефективна рідинна хроматографія пояснюється: води. Доступний тут