Різниця між ВЕРХ RP та HIC

The ключова різниця між RP HPLC та HIC це те, що RP HPLC використовує більш полярну рухливу фазу і менш полярну нерухому фазу. Тоді як HIC використовує стаціонарну гідрофобну фазу, яка дозволяє гідрофобним молекулам приєднуватися до неї.

Хроматографія - це аналітична методика, яка допомагає розділити суміш на її компоненти. По-перше, ми повинні розчинити зразок для поділу в розчин. Ця суміш розчин-речовина називається рухливою фазою. Потім рухлива фаза пропускається через інший матеріал, який називається нерухомою фазою. Стаціонарна фаза визначає поділ компонентів. Розділення відбувається через розподіл матеріалу між рухомою фазою та нерухомою фазою.

ЗМІСТ

1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке RPLC ВП
3. Що таке ГІК
4. Поплечне порівняння - RP HPLC проти HIC у табличній формі
5. Підсумок

Що таке RPLC?

Термін RP HPLC означає Рідка хроматографія з високою ефективністю зворотної фази. Він передбачає поділ компонентів у суміші відповідно до гідрофобності. Гідрофобні компоненти в рухливій фазі зв'язуються з іммобілізованими гідрофобними лігандами на нерухомій фазі, тоді як гідрофільні компоненти елююють через нерухому фазу, не приєднуючись до поверхні нерухомої фази.

Малюнок 01: Апарат ВЕРХ

Більше того, цей метод має більшу відтворюваність порівняно з іншими хроматографічними методами, і він також показує широку застосованість. Тому ми використовуємо цей метод у лабораторіях для понад 75% усіх методів ВЕРХ. Більшу частину часу ми використовуємо водну суміш води з змішуваним полярним органічним розчинником як рухливу фазу. Таким чином, це забезпечить приєднання гідрофобних компонентів у розчині до поверхні нерухомої фази.

Що таке HIC?

Термін HIC означає Хроматографія гідрофобної взаємодії. Це тип зворотно-фазної ВЕРХ, і цей метод використовується переважно для відділення великих біомолекул, таких як білки. У цьому методі нам потрібно використовувати водну середу для виготовлення зразка біомолекули. Це тому, що органічні розчинники можуть викликати денатурацію білків. Більше того, ця методика використовує взаємодію великих молекул зі злегка гідрофобною поверхнею нерухомої фази. Крім того, ми повинні використовувати високу концентрацію солі у зразку, оскільки це спонукає білок утримуватися на упаковці; цей процес називається засолюванням. Поступово знижуючи концентрацію солі, ми можемо змусити біомолекули елютувати окремо відповідно до їх гідрофобності.

Зазвичай у цьому методі використовуються умови, протилежні умовам іонообмінної хроматографії. У цій техніці спочатку нам потрібно пропустити буферний розчин через колонку, щоб зменшити сольватність розчиненого речовини в зразку. Це змушує гідрофобні ділянки білка піддаватися впливу. Однак, коли молекула є більш гідрофобною, для сприяння зв'язування потрібно менше солі. Тут спочатку елююють менше гідрофобних розчинників, і відповідно до зміни концентрації солі, останнім елююється більше гідрофобних розчинників..

Яка різниця між RP HPLC та HIC?

Хроматографія - це аналітична методика поділу компонентів у суміші. RP HPLC та HIC - дві спеціалізовані хроматографічні методи. Ключова відмінність RP HPLC від RP та HIC полягає в тому, що RP HPLC використовує більш полярну рухливу фазу і менш полярну нерухому фазу, тоді як HIC використовує гідрофобну нерухому фазу, яка дозволяє гідрофобним молекулам прикріплюватися до неї.

Нижченаведена інфографіка підсумовує різницю між ВЕРХ RP та HIC.

Підсумок - RPLC HP RP проти HIC

Довідка:

1. "Режими поділу ВЕРХ". Води, доступні тут.

Надано зображення:

1. "Підготовча ВЕРХ" від GYassineMrabetTalk & # x2709; Це не визначене W3C векторне зображення було створено за допомогою Inkscape. - Власна робота (CC BY 3.0) через Wikimedia Commons

Наука та природа