Рекомбінація та трансформація - це два вирішальні етапи в генній інженерії, де характеристики організму свідомо змінюються шляхом маніпулювання його генетичним матеріалом. Рекомбінація - це процес, при якому чужорідна ДНК вбудовується у векторний геном і утворюється рекомбінантна молекула ДНК. Трансформація - наступний етап, на якому рекомбінантна молекула вводиться в організм господаря. Клітина-господар або організм полегшує експресію рекомбінантної молекули. Ключова відмінність трансформантів від рекомбінантів полягає в тому, що трансформанти - це клітини або організми, які приймають всередині себе рекомбінантну молекулу і полегшують експресію поки рекомбінанти - це вектори, які дозволяють вставляти чужорідну ДНК в її геном і транспортувати в трансформанти-господарі для експресії.
ЗМІСТ
1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке трансформери
3. Що таке рекомбінанти
4. Поплечне порівняння - Трансформанти проти рекомбінантів
5. Підсумок
Трансформанти - це клітини або організми, в яких рекомбінантна ДНК береться для експресії. Бактерії зазвичай використовуються як організми-господарі в генній інженерії, оскільки їх легко вирощувати, розмножувати та обробляти в лабораторних умовах, а процес трансформації легкий порівняно з іншими організмами. Найпопулярніша бактерія-господар, що використовується в генній інженерії, - це бактерія Е coli.
Під час процесу трансформації клітини-господарі спонукають приймати рекомбінанти. Однак деякі клітини-господарі не приймають рекомбінантні молекули. Вони відомі як нетрансформанти, і клітини, які містять рекомбінантні молекули ДНК всередині, відомі як трансформанти. Відбір трансформантів з нетрансформантів проводиться за допомогою відбірних маркерів у молекулярній біології. Вибіркові маркери вставляються у векторний геном разом із вставкою ДНК. Часто використовувані селективні маркери - антибіотикорезистентні гени. Маркерні гени полегшують диференціювання трансформантів і продовжують процес. Після процесу трансформації бактерії вирощують у середовищі, що містить антибіотики. Тільки трансформанти здатні рости на цьому середовищі, оскільки вони володіють рекомбінантами всередині.
Після того, як рекомбінантна молекула ДНК трансформується всередині організму-господаря, чужорідна ДНК може бути або інтегрована в геном клітини-господаря, або залишатися неінтегрованою в цитоплазму. Однак експресія та реплікація чужорідної ДНК відбуваються в організмі хазяїна і дають бажаний результат у процесі.
Рекомбінантний організм або клітина, яка має рекомбінований геном, що містить чужорідну ДНК. Рекомбінанти - результат генно-інженерного процесу. Вони штучно побудовані в пробірці шляхом вставки цікавлять генів та модифікації геному. Часто бактеріальні плазміди та бактеріофаги виступають рекомбінантами в генній інженерії. У ньому є химери різних ДНК. Рекомбінантна молекула ДНК переносить чужорідну ДНК в організм хазяїна і змушує її експресувати та утворювати бажаний продукт.
Рекомбінантні молекули побудовані за допомогою рестрикційних ендонуклеаз та лігаз ДНК. Бажаний фрагмент ДНК відокремлюють від вихідного організму і вставляють у вектор, щоб зробити рекомбінантний для трансформації. Вирізання цікавить гена та відкриття векторного організму слід проводити за допомогою одного і того ж ферменту рестрикції, щоб створити сумісні липкі кінці, щоб з'єднати їх разом. Після включення чужорідної ДНК у векторний геном вона стає відомою як рекомбінантна або рекомбінантна молекула ДНК.
Малюнок 02: Рекомбінантна ДНК
Трансформанти проти рекомбінантів | |
Трансформанти - це клітини, які всередині мають рекомбінантну молекулу ДНК. | Рекомбінанти - це молекули-носії, які мають сторонні ДНК, вставлені у власний геном. |
Експресія чужорідної ДНК | |
Вони є клітинами-хазяями, які здатні експресувати рекомбінантну ДНК. | Вони повинні мати можливість самовідтворюватися в організмі господаря. |
Вибір | |
Клітини, які можна легко вирощувати та розмножувати, відбирають як клітини господаря. | Вони повинні легко витягуватися і повинні містити маркери, що вибираються. |
Трансформанти - це клітини або організми з рекомбінантними молекулами ДНК всередині них. Рекомбінанти - це організми або клітини, які пройшли генетичну рекомбінацію і мають чужорідну ДНК у своїх геномах. Бактеріальні клітини часто використовуються як клітини-господарі для трансформації, а плазміди та бактеріофаги часто використовуються як вектори в технології рекомбінантних ДНК. Це різниця між трансформантами та рекомбінантами.
Список літератури:
1. Гріффітс, Ентоні JF. "Створення рекомбінантної ДНК". Вступ до генетичного аналізу. 7-е видання. Національна медична бібліотека США, 01 січня 1970. Веб. 08 квітня 2017р
2. Купер, Джеффрі М. "Рекомбінантна ДНК". Клітина: молекулярний підхід. 2-е видання. Національна медична бібліотека США, 01 січня 1970. Веб. 08 квітня 2017р
Надано зображення:
1. "Рекомбінантне утворення плазмід" від Minestrone Soup в англійській Вікіпедії (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia