Трансформація проти трансфекції
Трансформація та трансфекція - це дві прості методи, що застосовуються для введення чужорідного гена в клітину-хазяїна. Однак ці методи залежать від типу хост-або векторних систем.
Що таке трансформація клітин?
Трансформація - це техніка, що застосовується для введення генів у дріжджові та бактеріальні клітини. Ця методика зазвичай викликає спадкові зміни генів, і, таким чином, експресія гена є постійною. Бактеріальна трансформація вперше була введена в 1928 році Фредеріком Гріффітом. Потім на початку 1970-х цей прийом застосовували в Кишкова паличка. У процесі перетворення о Кишкова паличка, клітини замочують у крижаному розчині CaCl2. Цей крок робить E.coli клітини компетентні. Після цього компетентні клітини змішують з плазмідною ДНК і інкубують на льоду протягом 20-30 хв. Потім наводиться короткий тепловий удар для того, щоб дозволити передачу ДНК в клітину. Нарешті, клітини поміщають у живильний бульйон та інкубують при 37 ° С протягом 60-90 хв для встановлення плазмід. Після успішного завершення цих етапів трансформовані клітини можуть бути поміщені на відповідний носій для розмноження клітин. Оскільки трансформація розглядається як неефективна методика, вона може не застосовуватися для підготовки банків-клонів.
Що таке клітинна трансфекція?
Трансфекція - це метод впровадження чужорідного гена, як правило, в клітини ссавців. Існує два способи трансфекції; а саме транзиторна трансфекція та стабільна трансфекція. При тимчасовій трансфекції експресія генів доступна обмежений час; таким чином, зміна гена викликає тимчасову експресію. Цей спосіб зараження простий і швидкий; отже, його можна використовувати звичайно. Одним з недоліків транзиторної трансфекції є труднощі застосування для широкомасштабних систем синтезу білка.
Під час стабільної трансфекції цільовий ген інтегрується в геном клітини-господаря, і таким чином експресія гена є постійною, на відміну від перехідної трансфекції.
Яка різниця між Трансформацією та Трансфекцією?
• Трансформація - це введення гена в прокаріотичну клітину (бактеріальні та дріжджові), тоді як трансфекцію зазвичай називають введенням гена в клітину ссавців..
• Трансформація призводить до спадкової зміни в генах, тоді як трансфекція може призвести до тимчасової експресії або постійних змін генів..