Різниця між конкурентним та неконкурентоспроможним ІФА

The ключова різниця між конкурентною та неконкурентоспроможною ІФА це те, що конкурентний ELISA використовує антиген інгібування, тоді як неконкурентний ELISA не використовує антиген інгібування для аналізу.

Аналіз на імуноферментний зв'язок (ІФА) - це імунологічний аналіз, який виявляє різні мішені, такі як антитіла, антигени, білки та глікопротеїни. Це швидкий і простий спосіб виконання. Отже, його частіше використовують у науково-діагностичних цілях. ІФА передбачає використання ферментів та специфічне зв'язування антитіла та антигену. Виходячи з того, як відбуваються реакції, існує чотири типи ІФА: прямий ІФА, непрямий ІФА, сендвіч-ІФА та інгібуючий ІФА. Прямий, непрямий та сендвіч-ІФА - це типи неконкурентоспроможних ІФА, тоді як інгібування ІФА - це тип комплементарного ІФА. Основна мета цієї статті - обговорити різницю між конкурентним та неконкурентоспроможним ІФА.

ЗМІСТ

1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке конкурентоспроможний ІФА
3. Що таке неконкурентоспроможний ІФА
4. Подібність між конкурентними та неконкурентоспроможними ІФА
5. Поплечне порівняння - конкурентоспроможний проти неконкурентоспроможний ІФА у табличній формі
6. Підсумок

Що таке конкурентна ІФА?

Конкурентоспроможний ІФА вимірює концентрацію антигену в пробі шляхом виявлення перешкод сигналу. Тут аналіз використовує антиген-інгібітор. Отже, це тип гальмування ІФА. Під час цієї процедури антигени, присутні у зразку, конкурують з обраним референтним антигеном за зв'язування з певною кількістю міченого антитіла. Крім того, ця процедура починається з інкубації зразка із надлишком міченого антитіла. Крім того, еталонний антиген повинен бути попередньо нанесений на планшет для аналізу декількох лунок. Потім суміш для зразків слід додати до досліджуваної тарілки, яка містить еталонний антиген. Вільні антитіла будуть зв'язуватися з референтним антигеном залежно від кількості антигену в зразку. Отже, якщо присутній більше зразка антигену, буде виявлено менше еталонного антигену. Таким чином, він створює слабший сигнал.

Малюнок 01: ІФА

На противагу цьому, коли зразок містить меншу кількість антигену, все більше і більше референтного антигену будуть займати антитіла і подавати сильний сигнал. Оскільки конкурентний ІФА дає сильніший сигнал, коли проба містить низьку кількість антигенів, конкурентний ІФА є дуже чутливим аналізом навіть для зразків з невеликою кількістю антигенів.

У деяких конкурентних наборах ELISA використовується мічений антиген замість міченого антитіла. Тут мічений антиген і зразковий антиген змагатимуться за зв'язування з первинним антитілом. Аналогічно, коли кількість антигену в зразку буде низькою, кількість міченого антигену, який зв'язується з антитілами, буде вище і створить більш сильний сигнал.

Що таке неконкурентоспроможний ІФА?

Серед чотирьох типів ІФА, три типи - це неконкурентоспроможний ІФА. Це прямий ІФА, непрямий ІФА та бутербродний ІФА. Усі три формати працюють за загальним принципом ІФА з невеликими відмінностями у їхніх методологіях.

Прямий ІФА використовує фермент, мічений первинним антитілом. Отже, воно не потребує вторинного антитіла. Тому прямий ІФА швидше, ніж інші типи ІФА. Первинне антитіло буде безпосередньо зв'язуватися з іммобілізованим цільовим антигеном, який присутній у планшеті. Значить, відбудеться ферментативно-субстратна реакція, виробляючи видимий сигнал.

Малюнок 02: Сендвіч-ІФА

На відміну від прямого ІФА, непрямий ІФА використовує незазначене первинне антитіло та фермент, мічений вторинним антитілом. Як тільки первинне антитіло зв'язується з іммобілізованим антигеном, вторинне антитіло зв'язується з первинним антитілом. Фермент у вторинному антитілі буде реагувати з антигеном і видавати видимий сигнал. Сендвіч-ІФА відрізняється як прямим, так і непрямим ІФА. Тут антитіло іммобілізовано до стінки досліджуваної пластини.

Які подібності між конкурентними та неконкурентоспроможними ІФА?

• Конкурентний та неконкурентоспроможний ІФА - це два типи методів імуноферментного аналізу.
• Вони є надзвичайно гнучкими та чутливими методами.
• Крім того, і конкурентний, і неконкурентний ІФА є імуноферментним аналізом.
• Також обидва способи генерують сигнал завдяки реакції фермент-субстрат.

Яка різниця між конкурентною та неконкурентоспроможною ІФА?

Конкурентна ІФА - це тип ІФА, який спирається на заповнення між аналізованим антигеном та міченим антигеном для обмеженої кількості специфічного антитіла. З іншого боку, не існує такої конкуренції між цікавим антигеном та референтним антигеном у неконкурентному ІФА. Таким чином, це ключова різниця між конкурентним та неконкурентоспроможним ІФА. Аналогічно, конкурентний ІФА є інгібіторним ІФА, тоді як неконкурентоспроможний ІФА не є інгібіторним ІФА. Отже, це також різниця між конкурентним та неконкурентоспроможним ІФА.

Більше того, конкурентний ІФА більш підходить для вимірювання низької кількості цікавить антигену. Це чутливий метод. З іншого боку, неконкурентоспроможний ІФА не залежить від кількості антигенів, присутніх у пробі. Тому це також різниця між конкурентним та неконкурентоспроможним ІФА.

Нижче в інфографіці пояснюється різниця між конкурентною та неконкурентоспроможною ІФА порівняно.

Підсумок - Конкурентоспроможний та неконкурентний ІФА

Конкурентний та неконкурентоспроможний ІФА - це два основних типи ІФА або імуноферментних аналізів. Підсумовуючи різницю між конкурентним та неконкурентоспроможним ІФА, конкурентний ІФА спирається на конкуренцію між антигеном, що цікавить, та референтним антигеном у відношенні обмеженої кількості антитіл. Тому конкурентну ІФА також називають інгібуючим ІФА. З іншого боку, неконкурентоспроможний ІФА не покладається на конкуренцію між цільовими антигенами та референтними антигенами. Він використовує надлишок міченого специфічного антитіла до цікавого аналіту. Таким чином, це ключова різниця між конкурентним та неконкурентоспроможним ІФА. Прямий ІФА, непрямий ІФА та сендвіч ІФА - це три основні типи неконкурентоспроможних ІФА.

Довідка:

1. Біо-Рад. "Види ІФА | Біо-Рад ». Біо, доступні тут.
2. "Чотири типи ІФА." Cusabio Life Science - Ваш партнер з біологічних наук, доступний тут.

Надано зображення:

"Elisa tipus" від Carolfv333 - Власна робота (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
"Сендвіч Іммуноаналіз, ELISA" Автор NickCT - Власна робота (CC BY-SA 3.0) через Wikimedia Commons