Ключова відмінність між HPLC та HPTLC полягає в тому, що ВЕРХ дозволяє кількісне розділення компонентів у зразку, тоді як HPTLC не дозволяє кількісне розділення компонентів у вибірці.
Хроматографія - це метод фізичного поділу, який використовується для розділення та ідентифікації компонентів у суміші. І HPLC, і HPTLC - це хроматографічні методи. ВЕРХ - це високоефективна рідинна хроматографія. HPTLC - це високоефективна тонкошарова хроматографія.
1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке ВЕРХ
3. Що таке HPTLC
4. Порівняльне порівняння - ВЕРХ проти HPTLC у табличній формі
5. Підсумок
ВЕРХ є високоефективна рідинна хроматографія. Це аналітична методика, яка використовується для розділення, ідентифікації та кількісної оцінки компонентів у суміші. У цій техніці зразок розчиняють у відповідному розчиннику. Потім розчинник із зразком пропускають через насос із заданим тиском. Насос наповнений твердим адсорбентом. Тоді деякі компоненти сильно зв'язуються з абсорбуючим матеріалом, тоді як інші компоненти зв'язуються нещільно. Це призводить до того, що компоненти мають різний витрата через насос. Тому компоненти можна легко розділити.
Малюнок 01: Система ВЕРХ
Матеріал адсорбенту, що наповнює насос, відомий як стаціонарна фаза. Розчинник з розчиненим зразком відомий як рухлива фаза. Насос, що використовується в цій техніці, називається колоною. Колонка заповнена адсорбентом, найчастіше частинками кремнезему. Розмір цих частинок може коливатися в межах 2-50 мкм. На процес поділу впливає склад рухомої фази та температура системи. Взаємодії між нерухомою фазою та компонентом у зразку можуть бути гідрофобними взаємодіями, дипольно-дипольними взаємодіями, іонними зв’язками тощо.
Робочий тиск ВЕРХ значно вищий, ніж у традиційної рідинної хроматографії. Він лежить близько 50-350 бар. Різниця між рідинною хроматографією та ВЕРХ полягає в тому, що при рідкій хроматографії зразок потрапляє через колонку під дією сили тяжіння, тоді як у ВЕРХ зразок проходить під тиском через колонку. Розміри колонки та абсорбуючих частинок також дуже малі в порівнянні з традиційною рідинною хроматографією. Однак роздільна здатність, що надається методом HPLC, є вищою.
HPTLC є високоефективна тонкошарова хроматографія. Це вдосконалена та автоматизована форма традиційного TLC. Ця методика забезпечує ефективну роздільну здатність за короткий проміжок часу. У цьому методі аналізу вибірку та еталон можна аналізувати одночасно, що дозволяє порівнювати вибірку з еталонною. Це дає покращену аналітичну точність, ніж інші хроматографічні методи. Час, взятий на аналіз, менше. Методика - це недорога техніка.
Малюнок 02: Аналіз харчових барвників за допомогою HPTLC
Метод HPTLC - це простий процес, і етап підготовки зразків також усувається (У традиційній TLC, етап підготовки проби включається до поділу. Цей етап включає очищення та збагачення). Розчинник можна використовувати безпосередньо без будь-якої попередньої обробки, хоча інші хроматографічні методи вимагають попередньої обробки, наприклад дегазації, фільтрації тощо.
Матеріал адсорбенту, що використовується в HPTLC, - це діоксид кремнію з дуже невеликими розмірами частинок. У традиційній ТШХ розмір частинок діоксиду кремнію становить 5-20 мкм, тоді як, для ВЕРХТ, він становить 4-8 мкм. Зразок наносять на планшет HPTLC за допомогою аплікатора. Це дає рівномірне та безпечне застосування. Потім пластини поміщають у камеру, що має рухливу фазу. Камера повинна бути насичена парами рухомої фази. Після процесу HPTLC плями, які перемістилися, можуть бути виявлені. При виявленні плям на тарілці методом HPTLC використовується відповідна УФ область або йодна камера.
ВЕРХ проти HPTLC | |
ВЕРХ - це високоефективна рідинна хроматографія. | HPTLC - це високоефективна тонкошарова хроматографія. |
Техніка | |
У ВЕРХ рухливу фазу з розчинником пропускають через колонку, наповнену нерухомою фазою. | В HPTLC зразок виявляється на пластині TLC і поміщається всередину камери, що містить рухливу фазу; тоді зразку дозволяється мігрувати вгору пластину разом з рухливою фазою. |
Вимірювання | |
У ВЕРХ різниця між витратами компонентів через колонку використовується для поділу компонентів у вибірці. | У HPTLC різниця між пройденими відстанями кожного компонента у вибірці використовується для поділу компонентів у вибірці. |
Кількісне розділення | |
ВЕРХ дозволяє кількісне розділення компонентів у зразку. | HPTLC не дозволяє кількісне розділення компонентів у зразку. |
ВЕРХ і ВЕРХТ - дві хроматографічні методи. Ключова відмінність між HPLC та HPTLC полягає в тому, що HPLC дозволяє кількісний поділ компонентів у зразку, тоді як HPTLC не дозволяє кількісне розділення компонентів у зразку..
1. «Високопродуктивна рідинна хроматографія». Wikipedia, Фонд Вікімедіа, 10 квітня 2018 р., Доступний тут.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30 травня 2011 р., Доступний тут.
1. "HPTLCplatetoMS" від Kjaergaard в англійській Вікіпедії - Переведено з en.wikipedia у Commons (Public Domain) через Commons Wikimedia
2. "Hplc" PD Доктор рер. фіз. хабіл. Гертруд Морлок, доцент (Приватдожентин), Університет ГогенгаймуІнститут хімії харчових продуктів - Г. Морлок, К. Оелліг, бібліотекознавча служба CAMAG 103 (2009) через Commons Wikimedia