Різниця між HPLC та LCMS
Share
Ключова різниця - ВЕРХ проти LCMS
Давайте спочатку розглянемо значення HPLC та LCMS, перш ніж проаналізувати різницю між HPLC та LCMS. Хроматографія - це метод розділення в хімічному аналізі, де компоненти проби відокремлюються під час проходження через хроматографічне середовище. Він також передбачає взаємодію з вибіркою, стаціонарною фазою та рухомою фазою. HPLC означає Рідка хроматографія з високою ефективністю, і використовується як метод рідинної хроматографії в аналітичній хімії. Поєднання Рідка хроматографія та мас-спектроскопія (LCMS) розроблено для кількісного аналізу відібраних біомолекул і це високочутливий, точний та специфічний порядок аналізу порівняно з ВЕРХ. Це Ключова різниця між ВЕРХ та LCMC. Ця стаття ознайомить вас з ВЕРХ та ЛКМК, які займаються хімічним аналізом, та обговорять відмінності між ВЕРХ та ЖКМ.
Що таке ВЕРХ?
Популярна високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ) методика розділення в аналітичній хімії. Це в основному використовується для розділення компонентів, для ідентифікації та кількісної оцінки кожного компонента в суміші. Раніше цей метод був відомий як рідка хроматографія високого тиску оскільки це залежало від насосів для протікання рідкого розчинника під тиском, що складається із зразкової суміші, через колонку, наповнену твердим адсорбентом. Кожен компонент у зразку суміші по-різному взаємодіє з твердим адсорбентом, що призводить до різної швидкості потоку для різних складових. Це може призвести до відділення складових частин, коли вони витікають з колонки ВЕРХ.
ВЕРХ використовували для різних додатки як от аналіз рівня вітаміну D у крові, незаконне вживання наркотиків спортсменам шляхом виявлення залишків препарату в їх сечі, сортування складових складних біологічних зразків для наукових цілей та аналізу та виробництво фармацевтичних препаратів.
Що таке LCMS?
Рідка хроматографія-мас-спектрометрія (LCMS) - це аналітична методика, яка поєднує фізичні здатності розділення рідинної хроматографії з можливостями масового аналізу мас-спектрометрії (MS). Рідка хроматографія - це сепараційна техніка, а мас-спектрометрія використовується для аналізу співвідношення маси до заряду заряджених частинок. Фізичне розділення зазвичай досягається ВЕРХ і, як альтернатива, також LCMS ВЕРХ-МС. LCMS - це домінуюча аналітична техніка що має дуже висока точність, чутливість та специфічність порівняно з ВЕРХ. Таким чином, він корисний для багатьох застосувань, таких як дослідницькі цілі, аналіз на наркотики, аналіз продуктів харчування тощо. В основному це LCMS використовується для розділення, виявлення, ідентифікації та кількісної оцінки біохімічних властивостей конкретного зразка за наявності складних хімічних сумішей.
Яка різниця між ВЕРХ та LCMC?
Скорочення та визначення ВЕРХ та LCMC
ВЕРХ: ВЕРХ розшифровується як високоефективна рідинна хроматографія. Це техніка поділу, яка в основному використовується для розділення компонентів, ідентифікації та кількісної оцінки кожного компонента в суміші.
LCMS: LCMS розшифровується якРідка хроматографія та масова спектрометрія. Це аналітичний прийом, який поєднує фізичні здатності до роздільної рідинної хроматографії з здатністю аналізу мас мас-спектрометрії (MS).
Характеристика ВЕРХ та LCMC
Класифікація
ВЕРХ: Це лише метод рідкої хроматографії.
LCMS: Це поєднання методу рідинної хроматографії та методу масової спектрометрії.
Ефективність
ВЕРХ: Порівняно з LCMS, аналіз HPLC є менш ефективним та повільним.
LCMS: Порівняно з ВЕРХ, аналіз LCMS є ефективним та швидшим.
Чутливість
ВЕРХ: Порівняно з LCMS, аналіз HPLC є менш чутливим.
LCMS: Порівняно з ВЕРХ, аналіз LCMS є більш чутливим.
Специфіка
ВЕРХ: Порівняно з LCMS, аналіз ВЕРХ є менш специфічним.
LCMS: Порівняно з ВЕРХ, аналіз LCMS є більш специфічним.
Точність
ВЕРХ: ВЕРХ дає менш точні результати, ніж LCMS для визначення деяких хімікатів.
LCMS: LCMS дає більш точні результати, ніж ВЕРХ для визначення деяких хімікатів.
Компонент
ВЕРХ: ВЕРХ можна розглядати як складову LCMS.
LCMS: LCMS не може розглядатися як складова HPLC.
Іонне джерело
ВЕРХ: Джерело іона не існує в приладі ВЕРХ.
LCMS: Джерело іона присутнє в приладі LCMS.
Програми
ВЕРХ: Іони, полімери, органічні молекули та біомолекули можна проаналізувати за допомогою ВЕРХ.
LCMS: Органічні молекули та біомолекули можуть бути проаналізовані. На відміну від ВЕРХ, LCMS можна використовувати для дослідження неповнорозчинних сумішей.
Операція
ВЕРХ: Діаграма інструменту ВЕРХ наведена на рисунку 1, і вона зазвичай включає автопробник, насоси та детектор. Пробовідбірник вводить суміш для зразків у рухливу фазу (суміш під тиском розчинників, таких як вода, ацетонітрил та / або метанол), які переносять її в колону. Насоси подають бажаний потік і склад рухомої фази через колонку. Колонка заповнена адсорбентом, що представляє собою зернисту тверду частинку, таку як кремнезем або полімери. Детектор видає сигнал, пропорційний кількості присутності складової вибірки в колоні, тому дозволяє проводити кількісний аналіз обраних складових зразка. Інструмент HPLC контролюється, а аналіз даних забезпечується цифровим мікропроцесором та програмним забезпеченням користувача.
Фігура 1: Схема приладу ВЕРХ
LCMS: Діаграма інструменту LCMS наведена на малюнку 2. Екстракт зразка вставляється в колонку, що складається з ВЕРХ. У цій колонці зберігаються зразки метаболітів на основі фізичних знаків, і різні метаболіти надходять до мас-спектрометра через різні часові інтервали. Масова спектроскопія використовується для оцінки маси частинок, для визначення елементарного розташування молекули та для уточнення структур молекули. Однак зразок слід іонізувати для створення заряджених молекул, щоб визначити їх співвідношення маси до заряду. Тому замість інструментів HPLC LCMS складається з трьох додаткових модулів, таких як джерело заліза, аналізатор маси та детектор. Джерело іонів може перетворити зразок газової фази в іони, а аналізатор маси згрупує іони за їхніми масами за допомогою електромагнітних полів. Нарешті, детектор кількісно оцінює значення та доставляє дані кожного іона, присутнього у зразку. Техніку LCMS можна використовувати як для якісного, так і для кількісного застосування.
Малюнок 2: Схема інструменту LCMS
На закінчення, ВЕРХ є методом рідинної хроматографії, тоді як LCMS є комбінацією рідинної хроматографії та мас-спектрометрії. Обидва ці методи аналізу мають різні характеристики, але їх можна використовувати для ідентифікації та кількісної оцінки харчових композицій, фармацевтичних препаратів та інших біоактивних молекул.
Список літератури Арпіно, П. (1992). Масова спектрометрія комбінованої рідинної хроматографії. Частина ІІІ. Застосування термоспрею. Огляди мас-спектрометрії, 11: 3. Гербер, Ф., Круммен, М., Поттер, Х., Рот, А., Сіффрін, К. і Споендлін, C. (2004). Практичні аспекти високоефективної рідинної хроматографії з оберненою фазою з використанням колонок з частинками 3 мкм та монолітних колон у фармацевтичній розробці та виробництві, що працюють у сучасній належній виробничій практиці. Журнал хроматографії, 1036 рік (2): 127-133. Лі, М. С. та Кернс, Е. Х. (1999). Застосування ЖК / МС у розробці ліків. Огляди мас-спектрометрії, 18 (3-4): 187-279. Мюррей, К. К. (1997). З'єднання лазерної десорбції / іонізації за допомогою матриці з розділеннями рідини. Огляди мас-спектрометрії 16 (5): 283. Надано зображення: "Hplc", завантажений оригіналом, був Kjaergaard в en.wikipedia - Перенесено з en.wikipedia. (Публічне надбання) через Commons