Рибонуклеази - нуклеази, які специфічно деградують РНК на більш дрібні одиниці. Їх можна розділити на дві категорії; ендорібонуклеази та екзорибонуклеази. Ендорібонуклеаза - це ендонуклеаза, яка може або погіршити одноланцюжкову або дволанцюжкову РНК. Він розщеплює фосфодіефірні зв’язки у полінуклеотидній ланцюзі РНК. Прикладами є RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P і RNase H. Екзорибонуклеаза є екзонуклеазою, яка деградувала РНК, видаляючи кінцеві нуклеотиди або з 5'-кінця, або з 3'-кінця молекули РНК. Прикладами є RNase R, RNase II, RNase D і RNase PH. The ключова різниця між RNASE A і RNASE H є тим, що RNase A - це рибонуклеаза підшлункової залози, яка специфічно деградує одноланцюжкову РНК на більш дрібні компоненти, тоді як RNase H - неспецифічний фермент, який розщеплює РНК у гібриді РНК-ДНК на більш дрібні одиниці за допомогою гідролітичного механізму.
1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке RNASE A
3. Що таке RNASE H
4. Подібність між RNASE A і RNASE H
5. Порівняльне порівняння - RNASE A проти RNASE H у табличній формі
6. Підсумок
РНКаза А - це панкреатична рибонуклеаза, яка спеціально розщеплює парні залишки цитозину та урацилу на 3 'кінці одноланцюгової РНК. RNase H працює при більш високій концентрації солі (0,3 М або вище концентрації NaCl). Гідролітична реакція - два етапи. Він утворює 3 'фосфорильований продукт через 2', 3 'циклічний монофосфатний проміжний продукт. Хоча це специфічно для одноланцюгової РНК при більш високій концентрації солі, вона може також деградувати дволанцюжкову РНК і РНК у гібриді РНК-ДНК при більш низькій концентрації NaCl (нижче 0,3 М NaCl).
Брюс Мерріфілд вперше синтезував цей фермент. РНКаза А - дуже популярний фермент у молекулярних дослідженнях. РНК-аза підшлункової залози великої рогатої худоби є прикладом РНКази А. І це один з найжорсткіших ферментів, які використовуються в лабораторії. Цей фермент не потребує кофактора для своєї активності. Це високо термостабільний фермент. РНКаза А - це перший фермент і третій білок, для яких було виявлено правильну послідовність амінокислот. Цей фермент дуже малий із 124 амінокислотами та молекулярною масою 12600да. І він має чотири залишки гістидину (Його 12 та Його 119, які беруть участь у каталітичній реакції).
Малюнок 01: RNase A
RNase A може бути виділена кип'ятінням сирого зразка. Коли кипить, всі інші ферменти руйнуються, що залишилися РНКаза А. РНКаза А - надзвичайно стабільний фермент. Цей фермент інгібує протеїнові інгібітори рибонуклеази, важкі метали та уридин ванадатні комплекси.
РНКаза Н - це неспецифічний фермент рибонуклеази, який може деградувати РНК у гібриді РНК-ДНК за рахунок гідролітичної реакції. РНКаза Н розщеплює 3'-О-Р-зв'язок РНК у гібриді РНК-ДНК. Зрештою, він виробляє продукти, що закінчуються 3'OH та 5 'фосфатами. У реплікації ДНК вона відіграє ключову роль, видаляючи праймер РНК після утворення нових ланцюгів ДНК. У лабораторних умовах він специфічно деградує РНК у гібриді РНК-ДНК, але не ДНК та негібридизованій РНК. І цей фермент зазвичай використовується для руйнування шаблону РНК після формування першого комплементарного ланцюга ДНК під час синтезу кДНК.
Малюнок 02: RNase H
RNase H також використовується в аналізах захисту нуклеаз. Він також може бути включений до видалення хвоста поли А з мРНК. RNase H має здатність руйнувати некодуючу РНК всередині і зовні клітини. Іони металів необхідні як кофактори для цієї білкової активності. Для інгібування ферменту RNase H може використовуватися хелатор (EDTA).
RNASE A проти RNASE H | |
RNase A - це рибонуклеаза підшлункової залози, яка спеціально розщеплює 3 'кінець парних цитозину та урацилових залишків одноланцюгової РНК при більш високій концентрації солі. | RNase H - неспецифічний фермент рибонуклеази, який може погіршити РНК у гібриді РНК-ДНК за допомогою гідролітичної реакції. |
Характер розщеплення РНК | |
RNase A спеціально розщеплює одноланцюжкову РНК при більш високій концентрації солі. | РНКаза Н розщеплює РНК в гібриді РНК-ДНК. |
Потреба ко-факторів для діяльності | |
RNase A не потребує кофакторів для своєї активності. | RNase H потребує іонів металів як кофакторів для своєї активності. |
Інгібітори білкової активності | |
Білкові комплекси інгібіторів рибонуклеази, важкі метали та уридин ванадат пригнічують активність РНКази А. | Хелатор (EDTA) пригнічує активність RNase H. |
Видалення праймера РНК у реплікації ДНК | |
RNase A не використовується для видалення праймера РНК при реплікації ДНК. | RNase H використовується для видалення праймера РНК при реплікації ДНК |
Видалення шаблону ДНК в комплементарному синтезі ДНК (С-ДНК) | |
RNase A не використовується для видалення шаблону РНК під час комплементарного синтезу ДНК (С-ДНК). | RNase H використовується для видалення шаблону РНК під час комплементарного синтезу ДНК (С-ДНК). |
Видалення полі-хвоста в мРНК, гібридизованої до Oligo (dt) | |
RNase A не використовується для видалення "хвоста полі-А" в мРНК, гібридизованої до оліго (dt). | RNase H використовується для видалення "хвоста полі-А" в мРНК, гібридизованої до оліго (dt) |
Рибонуклеази - це нуклеазні ферменти, які мають здатність розщеплювати РНК на більш дрібні одиниці. Вони бувають двох типів; ендорібонуклеази та екзорибонуклеази. Ендобонуклеаза - це ендонуклеаза, яка має здатність до деградації одноланцюгової або дволанцюгової РНК. І він розщеплює фосфодіестерну зв’язок у полінуклеотидній ланцюзі РНК. RNase A і RNase H - дві ендорібонуклеази. RNase A - це рибонуклеаза підшлункової залози, яка спеціально розщеплює парні залишки цитозину та урацилу на 3 'кінці одноланцюгової РНК при більш високій концентрації солі. РНКаза Н - неспецифічний фермент рибонуклеази, який може погіршити РНК у гібриді РНК-ДНК за допомогою гідролітичної реакції. Це різниця між RNase A і RNase H.
Ви можете завантажити PDF-версію цієї статті та використовувати її в офлайн-цілях відповідно до примітки. Завантажте PDF-версію тут Різниця між RNASE A та RNASE H
1.Карутурі, Автор Амрута. "17 потрібно знати факти про RNase A." AG Blog, 22 лютого 2017. Доступний тут
2. "Рибонуклеаза". Вікіпедія, Фонд Вікімедіа, 5 січня 2018 р. Доступний тут
1.'RNase A'By Не надано машиночитаного автора. Vossman припускав (на основі претензій щодо авторських прав)., (CC BY-SA 2.5) через Wikimedia Commons
2.'RNase H fix'By Не надано машиночитаного автора. Vossman припускав (на основі претензій щодо авторських прав)., (CC BY-SA 2.5) через Wikimedia Commons