Вектори використовують у молекулярному клонуванні. Вектор можна визначити як молекулу ДНК, яка веде себе як носій для перенесення чужорідного генетичного матеріалу в іншу клітину. Вектор, що містить чужорідну ДНК, відомий як рекомбінантна ДНК, і він повинен мати можливість реплікації та експресії в організмі хазяїна. Дріжджова штучна хромосома (YAC) і штучна хромосома бактерій (BAC) - це два типи векторів, які беруть участь у клонуванні. Ключова відмінність YAC від BAC полягає в тому YAC - це штучно побудована векторна система, що використовує специфічну область дріжджової хромосоми для вставки великих сегментів генетичних матеріалів до клітин дріжджів поки BAC - це штучно побудована векторна система, що використовує конкретну область Кишкова паличка хромосому для вставки великих сегментів ДНК Кишкова паличка клітини.
ЗМІСТ
1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке вектори YAC
3. Що таке вектори BAC
4. Поплечне порівняння - YAC проти BAC Vectors
5. Підсумок
YAC (дріжджова штучна хромосома) - це штучно побудована хромосома, яка має здатність переносити великий сегмент сторонньої ДНК і реплікацію всередині клітин дріжджів. Він має центромер, теломери, а також автономно реплікуючі послідовності, які мають важливе значення для реплікації та стабільності. YAC також повинен мати селективний маркер або маркери та сайти обмеження, щоб зробити його ефективним вектором клонування. Велика послідовність, що становить від 1000 kb до 2000 kb, може бути вставлена в YAC і перенесена в дріжджі. Ефективність трансформації YAC дуже низька.
Малюнок 01: Вектор YAC
Бактеріальна штучна хромосома (BAC) - це штучно побудована хромосома для молекулярного клонування. Він має конкретні регіони Росії Кишкова паличка F плазміда, вона кругла і супер спіральна. BAC розроблений для клонування фрагментів ДНК до бактерій, особливо до Кишкова паличка. Він може нести фрагменти ДНК, що мають розміри до 300 кб. Порівняно з YAC, вставки для клонування BAC мають менші розміри. BAC були розроблені в 1992 році, і він все ще популярний завдяки своїй стабільності та простоті в будівництві. BAC також корисні при розробці вакцин.
Малюнок 02: Вектор BAC в молекулярному клонуванні
YAC проти BAC Vectors | |
YAC - генетично сконструйована хромосома з використанням дріжджової ДНК з метою клонування. | BAC - це генетично сконструйована молекула ДНК Кишкова паличка ДНК з метою клонування. |
Стать | |
YAC були розроблені для клонування великих фрагментів геномної ДНК у дріжджі. | BAC були розроблені для клонування великих геномних фрагментів в паличку Escherichia. |
Вставка довжини | |
YAC можуть містити генетичні вставки розміром мегабази. (1000 kb - 2000 kb). | BAC можуть переносити вставки 200-300 кб або менше. |
Будівництво | |
YAC ДНК важко очистити неушкодженим і вимагає високої концентрації для генерування векторної системи YAC. | BAC легко очищається неушкодженим і може бути легко побудований. |
Химеризм | |
YAC часто химерні. | BAC рідко химерні. |
Стабільність | |
YAC нестабільний. | BAC стабільний. |
Модифікації | |
Рекомбінація дріжджів дуже здійсненна і завжди залишається активною. Отже, він може генерувати видалення та інші перебудови в YAC. | Кишкова паличка рекомбінація запобігається і включається, коли це потрібно. Отже, це зменшує небажані перебудови в BAC. |
Технічне обслуговування | |
Маніпуляція рекомбінантними YAC зазвичай вимагає переведення YAC Кишкова паличка для наступних маніпуляцій. Отже, це трудомісткий процес. | Модифікація BAC відбувається безпосередньо в Кишкова паличка. Тому немає необхідності в передачі ДНК. Отже, процес не є трудомістким. |
YAC став важливим інструментом дослідження процесів клонування завдяки його здатності клонувати великі фрагменти ДНК в організм господаря. Однак YAC мають ряд недоліків, таких як вектори, такі як будівельні труднощі, химеризм, нестабільність тощо. Тому для подолання цих проблем вчені розробили вектори BAC. BAC був побудований з використанням конкретних регіонів Кишкова паличка хромосома. Це стабільний вектор і його легко можна побудувати. Однак довжина ДНК, з якою може оброблятися BAC, до 20 разів менша, ніж у YAC. Це різниця між векторними системами YAC і BAC. В даний час BAC є більш переважним, ніж YAC в лабораторіях.
Список літератури
1. Шеро, Дж. Х., М. К. Маккормік, С. Е. Антонаракіс та П. Гієтер. "Дріжджові штучні хромосомні вектори для ефективної маніпуляції та картографування клоном". Genomics.U.S. Національна медична бібліотека, червень 1991 року. Веб. 25 березня 2017 року
2. Рамсей, М. «Клонування штучної хромосоми з дріжджів». Молекулярна біотехнологія. Національна медична бібліотека США, квітня 1994. Веб. 25 березня 2017 року
Надано зображення:
1. "BACs клонування векторів Chem114A" Tinastella - (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia