SDS PAGE проти електрофорезу в гелі
Електрофорез може бути використаний для визначення маси об'єкта, як правило, для білка та дезоксирибонуклеїнової кислоти (ДНК). Нитка ДНК при введенні до хімічних речовин може пришвидшити або уповільнити інформаційний процес. ДНК-маркери відомої маси використовуються для наближення розмірів об'єктів, що рухаються після закінчення електрофорезу. Електрофорез, швидше за все, є найбільш використовуваним інструментом для молекулярних біологів та біохіміків.
Існує два типи електрофорезу, які зазвичай використовуються в цьому процесі. Це електрофорез гель-електродефосфат додецилсульфату натрію (SDS-PAGE) та електрофорез природного гелю.
SDS-PAGE - неселективний метод електрофорезу гелів, який використовується в таких галузях, як: біохімія, криміналістика, біологія та генетика для відриву білка від їх електрофоретичної рухливості. SDS є аніонною поверхнево-активною речовиною, яку можна використовувати для сприяння лізингу клітин під час вилучення ДНК та для відділення білків у SDS-PAGE. Під час електрофорезу суміш білка спочатку зріджується в розчині SDS. Потім речовина під назвою Меркаптоетанол застосовують для видалення дисульфідних зв'язків, щоб зробити білок лінійним. Потім починається електрофорез. Результати дають два залишки молекул, одна з яких - SDS-PAGE.
Відсутність SDS-PAGE не є проблемою, оскільки гель-електрофорез все ще може бути зроблений лише тим, що білки не втрачають усієї своєї вторинної та третинної структури і не відкриваються на загально прямі стрижні.
Тим часом, нативний гель-електрофорез використовує гель як протиконвективне середовище. Зазвичай його використовують для поділу біологічних макромолекул, таких як ДНК, рибонуклеїнова кислота (РНК) та білок. Його також можна використовувати для відділення наночастинок.
Є два основні гелі, які використовуються в електрофорезі нативного гелю, а саме:
Гель агарози, який використовується для великих молекул. Цей гель не виявляє невеликих відмінностей між двома молекулярними смугами. Він також використовується виключно для поділу ДНК. Візуалізація агарозного гелю проводиться сумішшю броміду етидію.
Поліакриламідний гель, який використовується для менших молекул. Цей гель визначає відмінності між молекулярними смугами. Крім ДНК, він також може відокремлювати білки.
Підсумок:
1.SDS-PAGE - це неселективний метод гель-електрофорезу, який використовується в таких галузях, як: біохімія, криміналістика, біологія та генетика для відриву білка від їх електрофоретичної рухливості, в той час як гелевий електрофорез зазвичай використовується для відділення біологічних макромолекул, таких як ДНК, рибонуклеїнової кислоти (РНК) та білка. Його також можна використовувати для відділення наночастинок.
2.Нативний гель-електрофорез має два типи, а саме: агарозний гель та поліакриламідний гель.